五步蛇最怕的天敌包括野猪、人类、王锦蛇(菜花蛇)、猫科动物等。野猪对五步蛇的毒液拥有抵抗能力,因此五步蛇难以伤害它。王锦蛇(菜花蛇)会攻击五步蛇,因为它会吃同类。此外,平头哥蜜獾和蛇雕也是五步蛇的天敌,前者对蛇毒有极强的免疫能力,后者则特别喜欢吃蛇。